厲害了,我的PCR擴增儀
點(diǎn)擊次數:2240 更新時(shí)間:2020-03-14
PCR擴增儀是利用PCR技術(shù)對特定DNA擴增的一種儀器設備,被廣泛運用于醫學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗室中,例如用于判斷檢體中是否會(huì )表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復制以及親子鑒定等。將轉錄和翻譯在單細胞水平上聯(lián)系起來(lái),為深入理解分子生物學(xué)中心法則提供了新的視角。
轉錄和翻譯是分子生物學(xué)中心法則中基因表達的兩個(gè)基本過(guò)程。細胞的克隆群體可能存在高度異質(zhì)性,即同樣的基因在不同的細胞個(gè)體中具有不同的mRNA和蛋白拷貝數。這種基因表達上的變異會(huì )導致不同的表型,影響諸多細胞的功能,包括發(fā)育、體內穩態(tài)、疾病過(guò)程。要想了解這種基因差異表達的原因和結果,需要在單細胞水平對mRNA和蛋白進(jìn)行準確定量。PCR擴增儀的出現,為科學(xué)家們提供了簡(jiǎn)單可行的手段,無(wú)需繁瑣的遺傳學(xué)操作,易于重復和推廣。
在單細胞水平計數mRNA的拷貝數已應用于很多研究,而在單細胞水平計數蛋白質(zhì)分子的數量則相當具有挑戰性。現有的各種技術(shù)需要繁瑣的遺傳操作或復雜的實(shí)驗設備,而且往往只能獲得蛋白質(zhì)的相對豐度。為了解決這個(gè)問(wèn)題,科學(xué)家將ddPCR技術(shù)與鄰近連接測試技術(shù)相結合,并建立的數學(xué)模型,實(shí)現對單個(gè)哺乳動(dòng)物細胞中的蛋白拷貝數的定量。真核生物或原核生物中都能觀(guān)察到單細胞中mRNA和蛋白含量的瞬時(shí)相關(guān)性很低的情況,這種弱相關(guān)性可能源自mRNA和蛋白質(zhì)半衰期的差異,亦或是轉錄后調控因素導致不同細胞間每個(gè)mRNA分子翻譯的蛋白質(zhì)數量的差異。
動(dòng)態(tài)基因調控在各種細胞調控系統中廣泛存在,隨著(zhù)研究的深入,單細胞分析技術(shù)和方法獲得越來(lái)越多的重視和發(fā)展。PCR擴增儀流程簡(jiǎn)單,易于推廣。籍此科學(xué)家們能對單個(gè)細胞中基因的轉錄和翻譯拍攝數字快照,通過(guò)數字化定量勾勒出基因表達調控網(wǎng)絡(luò ),更加深入解析基因調控的本質(zhì)和基本原理。